Orenburg, Russian Federation
636.39
The purpose of the study is to identify patterns of changes in the content of progesterone, FSH, LH and free estriol under various options for inducing the reproductive cycle of ewes with hormonal drugs. Objectives: during the period of spring anaphrodisia, to stimulate sexual oestrus in ewes using a double injection of estrofan; during the same period, to stimulate sexual estrus in ewes according to the follimag-progestamag, surfagon scheme; to study the nature of changes in the content of sex hormones in the blood serum of ewes during the implementation of the specified schemes for stimulating sexual heat; to identify the pattern of dynamics of sex hormones in ewes during an induced sexual cycle. The study was conducted in the Orenburg Region in April 2022 on Romanov breed ewes. Three groups of ewes of 12 heads each were formed. The age of the sheep is 3–5 years, live weight is 30–35 kg. The experiment was carried out against the background of fortification of sheep with E-selenium. In groups I (control) and II, animals were administered E-selenium on the 1st and 11th days of the experiment, in group III – on the 1st and 8th days. Hormonal stimulants were not used in the control; in group II, sheep were administered estrofan on days 1 and 11 and surfagon on the 13th day of the experiment; in group III, follimag was used on the 1st day, progestamag and surfagon on the 8th day. To determine the hormone content, blood was taken from the jugular vein from all animals on the 1st, 8th, 11th, 13th, and 14th days of the experiment. When stimulating sexual heat in ewes during seasonal anaphrodisia, the most pronounced hormonal response was obtained using injections of follimag and progestamag with surfagon at weekly intervals. When using this regimen, the levels of free estriol and LH reached their maximum values by the 11th day from the start of stimulation, creating optimal conditions for ovulation. After stimulating sexual heat in ewes, it is advisable to begin mating or insemination on the 10th–11th day.
ewes, seasonal anaphrodisia, stimulation of estrus, estrofan, follimag, progestamag, surfagon
Введение. В настоящее время овцеводство в РФ после длительного спада, вновь переживает период роста и развития. Для ускоренного наращивания поголовья необходимо увеличение количества приплода. Этого можно достичь, применяя биотехнологические методы, в т. ч. стимуляцию половой охоты у овцематок [1–4].
При традиционной технологии ведения овцеводства случку овец проводят осенью, окот у них происходит весной, при этом получают одного ягненка в год. Стимуляция половой охоты овцематок в весеннее время (период сезонной анафродизии) позволяет получать три окота в два года, что существенно увеличивает выход приплода и повышает эффективность отрасли в целом [5–7].
Для стимуляции половой охоты используют разные схемы и препараты [8]. Чаще всего, это прогестероновые препараты, гонадотропины и простагландины в различных модификациях и комбинациях друг с другом [9]. При выполнении любой из схем стимуляции необходимо представлять себе сущность гормонального ответа организма овец на препараты. Это позволит разработать оптимальное сочетание препаратов и наиболее технологичные схемы их применения [10].
Известно, что наиболее важными гормонами для реализации процессов воспроизводства являются гормоны яичника (прогестерон и эстрогены) и гипофизарные гонадотропины (фолликулостимулирующий гормон – ФСГ и лютеинизирующий гормон – ЛГ).
Цель исследования – выявление закономерностей изменений содержания прогестерона, ФСГ, ЛГ и свободного эстриола при различных вариантах индукции полового цикла овцематок гормональными препаратами.
Задачи: в период весенней анафродизии провести стимуляции половой охоты у овцематок с применением двукратной инъекции эстрофана; в этот же период провести стимуляцию половой охоты у овцематок по схеме фоллимаг-прогестамаг, сурфагон; изучить характер изменений содержания половых гормонов в сыворотке крови овцематок при выполнении указанных схем стимуляции половой охоты; выявить закономерность динамики половых гормонов у овцематок при индуцированном половом цикле.
Объекты и методы. Эксперименты проводились в пос. Караванный Оренбургской области (АО им. Гагарина) в апреле 2022 г. на овцематках романовской породы. Были сформированы три группы овцематок по 12 голов в каждой. Возраст овец – 3–5 лет, живая масса – 30–35 кг. Овцематки содержались в типовой кошаре, рацион соответствовал зоогигиеническим нормам. В период опыта животные находились в состоянии анафродизии, что соответствовало подсосному периоду выращивания их приплода и сезону года. Протоколы применения стимулирующих средств овцематкам указаны в таблице 1.
Таблица 1
Схема эксперимента
|
Группа |
Число животных в группе |
День эксперимента |
||||
|
1 |
8 |
11 |
13 |
14 |
||
|
I (контроль) |
12 |
Е-селен 1,5 мл |
|
Е-селен 1,5 мл |
|
|
|
II |
12 |
Е-селен 1,5 мл Эстрофан 0,3 мл |
|
Е-селен 1,5 мл эстрофан 0,3 мл |
Сурфагон 3 мл |
|
|
III |
12 |
Е-селен фоллимаг 500 МЕ |
Е-селен 1,5 мл прогестамаг 10 мл Сурфагон 3 мл |
|
|
|
Эксперимент проводился на фоне витаминизации овец Е-селеном. В I (контрольной) и II группах животным вводили Е-селен в 1-й и 11-й дни опыта, в III группе – в 1-й и 8-й дни. В контроле гормональных стимуляторов не применяли; во II группе овцам вводили эстрофан в 1-й и 11-й дни и сурфагон на 13-й день опыта; в III группе применили фоллимаг в 1-й день, прогестамаг и сурфагон – на 8-й день. Дозы препаратов указаны в таблице 1.
Для определения содержания гормонов у всех животных брали кровь из яремной вены в 1-й, 8-й, 11-й, 13-й, 14-й дни эксперимента.
Определение уровня гормонов проводили в условиях Испытательного центра ЦКП ФНЦ БСТ РАН (Оренбург, аттестат аккредитации RA.RU.21ПФ59 от 12.10.2015, URL: www.цкп-бст.рф; URL: http://ckp-rf.ru/ckp/77384).
Статистическая обработка проводилась с использованием приложения Statistica 10.0. Анализ включал определение средней величины по группам (М), стандартной ошибки средней (m). Достоверными считали различия средних при Р ≤ 0,05.
Результаты и их обсуждение. Результаты определения уровня гормонов у животных контрольной группы приведены в таблице 2. Установлено, что содержание прогестерона в их организме с 1-й по 8-й день снижалось на 60,0 % (Р ≤ 0,001), с 8-го по 13-й день оно снижалось незначительно, а к 14-му дню резко увеличилось (более, чем в 5 раз). Уровень ФСГ и ЛГ в ходе опыта изменялся противоположным образом. С 8-го по 13-й день он возрастал на 9,2–31,0 и 11,3–43,8 % соответственно (Р ≤ 0,01), а к 14-му дню снизился до исходных значений. Отмечено также повышение уровня свободного эстриола к 8-му дню опыта на 20,2 % (Р ≤ 0,05) с последующим снижением.
Таблица 2
Содержание гормонов в сыворотке крови овцематок I (контрольной) группы
по периодам опыта (M±m)
|
Показатель |
Сутки опыта |
||||
|
1 |
8 |
11 |
13 |
14 |
|
|
Прогестерон |
2,15±0,305 |
0,86±0,33 |
0,55±0,144 |
0,35±0,081 |
2,22±0,492 |
|
ФСГ, МЕ/л |
3,60±0,147 |
4,13±0,488 |
4,19±1,032 |
4,25±1,065 |
3,84±0,744 |
|
ЛГ, МЕ/л |
2,35±0,371 |
3,38±1,105 |
2,58±1,316 |
2,91±1,09 |
2,56±0,641 |
|
Свободный эстриол, нмоль/л |
3,76±0,239 |
4,52±0,393 |
3,84±0,649 |
3,80±0,679 |
3,24±0,477 |
Во II группе изменения уровня прогестерона у овцематок были аналогичными – снижение содержания гормона с 8-го по 13-й день опыта и пятикратное повышение к 14-му дню (табл. 3). Содержание ФСГ и ЛГ достигло максимальных значений к 8-му дню опыта (Р ≤ 0,05–0,01), а в дальнейшем плавно снижалось. Максимальный уровень эстриола отмечен также на 8-й день опыта.
Таблица 3
Содержание гормонов в сыворотке крови овцематок II группы в течение опыта (M±m)
|
Показатель |
Сутки опыта |
||||
|
1 |
8 |
11 |
13 |
14 |
|
|
Прогестерон |
1,24±0,658 |
0,30±0,050 |
0,44±0,134 |
0,42±0,101 |
2,02±0,314 |
|
ФСГ, МЕ/л |
4,02±0,286 |
4,95±0,427 |
3,74±0,246 |
3,83±0,282 |
3,02±0,159 |
|
ЛГ, МЕ/л |
2,32±0,619 |
3,33±0,607 |
3,17±0,768 |
3,00±1,411 |
1,85±0,484 |
|
Свободный эстриол, нмоль/л |
3,33±1,191 |
4,36±0,819 |
4,15±0,668 |
3,14±0,772 |
3,52±0,756 |
В таблице 4 представлены данные по содержанию гормонов в крови животных III группы. Здесь так же, как в I и II группах, уровень прогестерона достоверно снижается в течение 8–13-й дней опыта, а к 14-му дню происходит двукратное повышение его содержания. Уровень ФСГ и ЛГ так же, как у овец I и II групп, повышается в период с 8-го по 13-й день опыта, причем максимальных значений содержание этих гормонов достигает на 11-й день опыта. Отмечено также максимальное содержание свободного эстриола в крови овец в этот период.
Для проведения сравнительного анализа данные по изменениям содержания гормонов у овец трех подопытных групп изображены графически на рисунке 1.
Таблица 4
Содержание гормонов в сыворотке крови овцематок III группы в течение опыта (M±m)
|
Показатель |
Сутки опыта |
||||
|
1 |
8 |
11 |
13 |
14 |
|
|
Прогестерон |
1,63±0,219 |
0,87±0,155 |
0,89±0,089 |
1,03±0,065 |
2,38 ±0,113 |
|
ФСГ, МЕ/л |
4,45±0,633 |
4,86±0,771 |
5,83±0,875 |
5,72±0,684 |
4,88±0,918 |
|
ЛГ, МЕ/л |
3,02±0,527 |
3,36±1,078 |
4,12±1,598 |
3,93±1,942 |
3,72±1,822 |
|
Свободный эстриол, нмоль/л |
3,13±1,055 |
4,42±1,779 |
4,64±1,190 |
3,67±1,109 |
4,06±1,455 |
Анализ цифрового и графического материала показывает, что во всех трех подопытных группах динамика содержания половых гормонов в организме овец подчиняется определенным закономерностям. В период с 8-го по 13-й день от начала стимуляции уровень прогестерона снижается в несколько раз по сравнению с исходным. Очевидно, в этот период имеет место низкая функциональная активность желтых тел. К 14-му дню уровень прогестерона резко возрастает, что свидетельствует о достаточной зрелости желтых тел и полноценной инкреторной продуктивности.
Содержание гипофизарных гонадотропинов в крови овец в этот период (8–13-й дни) существенно повышается, а к 14-му дню снижается до исходного. Динамика уровня свободного эстриола при этом совпадает с таковой по ФСГ и ЛГ. Доказано, что повышение уровня эстрогенов предшествует предовуляторному пику ЛГ и, следовательно, создает предпосылки для овуляции. Такая динамика гормональных взаимоотношений характерна для спонтанных половых циклов у овцематок [11].
Рис. 1. Динамика уровня половых гормонов в сыворотке крови подопытных животных
в течение эксперимента
Для реализации функции размножения овец большое значение имеет сезон года [12–15]. При традиционной технологии овцеводства случку овец проводят осенью. Тогда у овцематок происходит несколько половых циклов один за другим, их средняя продолжительность 17 дней. В остальное время года половой цикличности у овец не наблюдается (сезонная анафродизия). В данном случае эксперимент проведен в апреле, в послеокотный лактационный период, то есть именно в период сезонной анафродизии у овцематок.
В I (контрольной) группе овцематкам стимулирующих препаратов не вводили, однако у них наблюдалась вышеописанная динамика половых гормонов. Это позволяет предположить, что у овец в период сезонной анафродизии происходят в яичниках скрытые процессы, аналогичные естественным половым циклам. Эти скрытые циклы происходят по укороченному типу (в среднем 14 сут) при этом фолликулы не дозревают до стадии овуляции и атрезируют. Если в этот период овцематкам ввести стимулирующие препараты, начинается клиническое проявление половой цикличности, и при случке или осеменении происходит оплодотворение.
В нашем опыте применялись две схемы стимуляции половой охоты у овцематок. Во II группе использовали двукратную инъекцию эстрофана через 11 сут, в III группе овцам инъецировали фоллимаг и через неделю – прогестамаг. В обоих случаях динамика гормональных изменений аналогична таковой при спонтанных половых циклах у овцематок. Однако значение изменений уровней гормонов у овец во II и III группах выше, чем в I, что можно считать проявлением стимулирующего эффекта. При сравнении результатов по II и III группам видно, что содержание ФСГ и особенно ЛГ достигает максимума у животных III группы к 11 дню от начала стимуляции, т. е. создаются оптимальные условия для овуляции и оплодотворения овцематок. Именно в эти сроки нужно проводить искусственное осеменение или организовывать случку овец. У животных II группы к этому сроку пик ЛГ будет уже пройден и при осеменении будут низкие результаты. Таким образом, наиболее физиологически обусловленной для организма овец можно считать схему стимуляции половой охоты с применением гонадотропинов и прогестероновых препаратов с недельным интервалом.
Заключение
- При стимуляции половой охоты овцематок в период сезонной анафродизии наиболее выраженный гормональный ответ получен при использовании инъекции фоллимага и прогестамага с сурфагоном с недельным интервалом.
- При использовании данной схемы уровни свободного эстриола и ЛГ к 11-му дню от начала стимуляции достигли максимальных значений, создавая оптимальные условия для овуляции.
- После стимуляции половой охоты у овцематок случку или осеменение целесообразно начинать на 10–11-й день.
1. Aybazov A.M.M., Mamontova T.V., Gubahanov M.A. Vspomogatel'nye reproduktivnye tehnologii v vosproizvodstve melkogo rogatogo skota (obzor) // Sel'skohozyaystvennyy zhurnal. 2022. № 2 (15). S. 29–36. DOI:https://doi.org/10.25930/2687-1254/004.2.15.2022. EDN DBSYPO.
2. Balkaran S., Zelenskaya L.A. Innovacionnye meropriyatiya, povyshayuschie produktivnost' i vosproizvodstvo stada // Vestnik nauchno-tehnicheskogo tvorchestva molodezhi Kubanskogo GAU: sb. st. po mat-lam nauch.-issled. rabot (Krasnodar, 1–31 oktyabrya 2018 g.) / Kubanskiy gosudarstvennyy agrarnyy universitet im. I.T. Trubilina. Krasnodar, 2018. S. 74–78. EDN ABKGQJ.
3. Mamontova T.V., Aybazov M.M., Seitov M.S. Rezul'taty vnutrimatochnogo laparoskopi¬cheskogo osemeneniya ovec zamorozhennoy-ottayannoy spermoy // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2018. № 2 (70). S. 159–161. EDN XNAHHV.
4. Pat. 2728190 C2 Rossiyskaya Federaciya, MPK A61D 19/04. Sposob otbora i iskusstvennogo osemeneniya ovec i koz / Mamontova T.V., Aybazov A.M.M., Zaharina M.I.; zayav. Severo-Kavkazskiy federal'nyy nauchnyy agrarnyy centr. № 2018139116; zayavl. 06.11.2018; opubl. 28.07.2020. EDN SVBHJI.
5. Zonturlu A.K., Kacar S., Senmez M. Sinhronizaciya estrusa u ovec (Ovis aries) porody avassi vne sezona razmnozheniya pri skarmlivanii vitamina E i mul'timineral'noy dobavki (Se, Sa, P, Su, Co) // Sel'skohozyaystvennaya biologiya. 2017. T. 52, № 2. S. 331–337. DOI:https://doi.org/10.15389/agrobiology.2017.2.331rus. EDN YMFVKR.
6. Kureninova T.V. Effektivnost' vyraschivaniya molodnyaka ovec Zapadno-Sibirskoy myasnoy porody // Vestnik Altayskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2018. № 2 (160). S. 107–111. EDN YQGQEK.
7. Chekunkova Yu.A., Mal'ceva O.E. Effektivnost' primeneniya razrabotannyh shem stimulyacii polovoy ohoty u ovec // Vestnik KrasGAU. 2021. № 5 (170). S. 122–128. DOI:https://doi.org/10.36718/1819-4036-2021-5-122-128. EDN UAVTCE.
8. Lukanina V.A., Chinarov R.Yu., Taradaynik N.P. Sravnitel'noe issledovanie rezul'tativnosti dvuh shem sinhronizacii polovoy ohoty u ovec // Zootehniya. 2021. № 12. S. 31–33. DOI:https://doi.org/10.25708/ZT.2021.51.73.009. EDN ICLOAV.
9. Sravnitel'nyy analiz effektivnosti frontal'nogo osemeneniya korov pri razlichnyh shemah sinhronizacii polovoy ohoty / P.I. Hristianovskiy [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2021. № 6 (92). S. 217–220. DOI:https://doi.org/10.37670/2073-0853-2021-92-6-217-221. EDN PNIIMQ.
10. Rukovodstvo po vnedreniyu reproduktivnyh tehnologiy v vosproizvodstvo krupnogo rogatogo skota: prakticheskie rekomendacii / V.I. Sorokin [i dr.]. Orenburg: Izd-vo OGAU, 2019. 112 s.
11. Metody intensifikacii vosproizvodstva v ovcevodstve (obzor) / P.I. Hristianovskiy [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2022. № 3 (95). S. 259–263. DOI: 10.37670/ 2073-0853-2022-95-3-259-263. EDN WSLBCR.
12. Aksenova P.V., Ermakov A.M. Biologiya reprodukcii koz: monografiya. SPb.; M.; Krasnodar: Lan', 2015. 272 s. EDN YHCJIJ.
13. Auzbaev S. A. Sinhronizaciya polovyh ciklov ovec pri iskusstvennom osemenenii // Zootehniya. 2017. № 11. S. 30–32. EDN ZQMXFN.
14. Ivanov Yu.A., Erohin A.S. Sluchnoy sezon i mnogoplodie ovcematok // Ovcy, kozy, sherstyanoe delo. 2017. № 1. S. 16–18. EDN YIFFCF.
15. Kolosova A.I., Gavrilov B.V. Primenenie metodov farmakoterapii i fizioterapii dlya stimulyacii polovoy funkcii u samok // Nauchnoe obespechenie agropromyshlennogo kompleksa: sb. st. po mat-lam 77-y nauch.-prakt. konf. studentov po itogam NIR za 2021 g. (Krasnodar, 1 marta 2022 g): v 3 ch. / otv. za vyp. A.G. Koschaev / Kuban. gos. agrar. un-t im. I.T. Trubilina. Krasnodar, 2022. S. 363–366. EDN VTVLRX.
