с 01.01.1971 по 01.01.2024
Благовещенск, Амурская область, Россия
с 01.01.2021 по настоящее время
Благовещенск, Амурская область, Россия
с 01.01.2024 по настоящее время
Благовещенск, Амурская область, Россия
с 01.01.1997 по настоящее время
Благовещенск, Амурская область, Россия
УДК 591.5 Образ жизни животных. Экология. Этология. Животное и окружающая среда (биономия)
Цель исследования – изучить морфологическую реакцию эритроцитов у кроликов на производственный стресс, вызванный перегруппировкой животных при ее коррекции пробиотиком. Объект исследования – беспородные взрослые кролики-самцы, содержащиеся в учебном виварии Дальневосточного государственного аграрного университета Амурской области в г. Благовещенске. Сформированы 2 группы животных по 5 особей в каждой по принципу пар-аналогов. Кроликам опытной группы за пять дней до перегруппировки и столько же дней после нее скармливали пробиотический препарат «Интестевит-ТМ» из расчета 0,5 г на голову. До начала эксперимента произведен контрольный забор крови. Эксперимент проводили в течение семи суток. Производственным стресс-фактором служила перегруппировка кроликов. Кровь отбирали на первые, третьи и седьмые сутки согласно стандартным методикам лабораторных исследований. Кровь исследовали на гематологическом анализаторе Mindray BC-2800 Vet. Получение данные подвергли вариационной статистикой обработке. Применение пробиотического препарата «Интестевит-ТМ» в дозе 0,5 г перорально позволяет стабилизировать общее содержание компонентов красной крови уже на первые сутки после перегруппировки кроликов. Без коррекции адаптационных способностей кроликов в указанный период, нормализация данных показателей наблюдается только на седьмые сутки. Морфологическая оценка состояния эритроцитов по форме, степени интенсивности их окраски, образования сланжей и других отклонений у животных, получавших пробиотический препарат «Интестевит-ТМ», указывает на их более раннюю приспособленность (1–2 сут) к изменению условий существования после перегруппировки в отличие от животных контрольной группы (до 7 сут и более).
эритроциты кроликов, стресс кроликов, морфология, животноводство, гематология, кролики
Введение. Стресс сельскохозяйственных животных стал актуальной проблемой в современном животноводстве. На протяжении всей жизни организм сталкивается с многочисленными стресс-факторами, способствующими ухудшению состояния животного, что приводит к потере его продуктивности [1, 2].
Гематологические исследования являются важной частью анализа морфофункциональной реакции производственного стресса сельскохозяйственных животных [3]. Установлены новые данные о характеристике адсорбционно-транспортной функции эритроцитов, заключающейся в том, что наружная оболочка красных кровяных клеток несет на себе огромное число молекул, которые исполняют различные функции [4]. Строма эритроцитов играет очень важную роль в антигенных свойствах и в групповой принадлежности крови. Эритроциты принимают активное участие в регуляции кислотно-щелочного равновесия организма, адсорбции токсических веществ и антител и являются участниками ряда ферментных процессов. Красные кровяные тельца содержат сложный железосодержащий белок – гемоглобин и переносят негемоглобиновое, легко отщепляемое железо, используемое в процессе кроветворения [5].
Стресс в организме животных способствует изменению микроциркуляторных, функциональных и структурных свойств эритроцитов, вызывая нарушение их полноценного морфофункционального состояния. В связи с этим снижаются жизненно важные функции и сопротивляемость организма животного [6].
Цель исследования – изучить морфологическую реакцию эритроцитов у кроликов на производственный стресс, вызванный перегруппировкой животных при ее коррекции пробиотиком.
Объекты и методы. Объект исследования – беспородные взрослые кролики-самцы, содержащиеся в учебном виварии Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования Дальневосточного государственного аграрного университета Амурской области в г. Благовещенске, среди которых была проведена плановая перегруппировка, связанная с изменением количества поголовья. Животные в виварии находятся при строгом соблюдении требований к их содержанию (ГОСТ 33215-2014 «Руководство по содержанию и уходу за лабораторными животными. Правила оборудования помещений и организации процедур»).
Сформированы 2 группы животных по 5 особей в каждой по принципу пар-аналогов. Схема исследований представлена в таблице 1.
Кроликам за пять дней до перегруппировки и столько же дней после в утреннее кормление индивидуально с кормом давали пробиотический препарат «Интестевит-ТМ» из расчета 0,5 г на голову. До начала эксперимента произведен контрольный забор крови. Эксперимент проводили в течение семи суток. Производственным стресс-фактором служила перегруппировка кроликов. Кровь отбирали на первые, третьи и седьмые сутки согласно стандартным методикам лабораторных исследований. Кровь исследовали на гематологическом анализаторе Mindray BC-2800 Vet. Получение данные подвергли вариационной статистикой обработке.
Результаты и их обсуждение. Количественные показатели содержания эритроцитов и других компонентов красной периферической крови представлены в таблице 1.
Таблица 1
Содержание показателей компонентов красной периферической крови кроликов (M ± m)
The content of the components of the red peripheral blood of rabbits (M ± m)
|
Показатель |
До стресса n = 10 |
1-е сут |
3-и сут |
7-е сут |
|||
|
Контроль n = 5 |
Опыт n = 5 |
Контроль n = 5 |
Опыт n = 5 |
Контроль n = 5 |
Опыт n = 5 |
||
|
Эритроциты, 1012/л |
7,4±0,16 |
5,4±0,44 |
6,8±0,14 |
5,1±0,46 |
6,7±0,18 |
5,3±0,5 |
7,0±0,1 |
|
Гемоглобин, г/л |
146,0±11,2 |
114,7±14,28 |
139,0±16,0 |
107,3±13,87 |
132,0±12,1 |
114,3±13,87 |
134,0±10,2 |
|
Гематокрит, % |
45,2±3,61 |
36,2±3,91 |
43,7±7,21 |
33,7±4,37 |
42,3±7,40 |
36,2±4,33 |
42,6±7,40 |
|
Средний объем эритроцитов, мкм3 |
63,3±2,54 |
67,2±2,14 |
63,8±7,21 |
66,6±2,56 |
64,2±12,10 |
68,0±2,1 |
63,5±09,02 |
|
Содержание гемоглобина в эр., пг |
20,5±0,90 |
21,2±0,92 |
20,2±1,44 |
21,1±1,01 |
20,2±1,21 |
21,4±0,59 |
21,1±1,01 |
|
Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах, г/л |
322,0±2,91 |
315,7±5,04 |
320,0±3,62 |
317,7±4,20 |
314,0±3,12 |
315,7±3,78 |
319,0±2,08 |
|
Гетерогенность размера эритроцита, % |
15,5±0,08 |
16,7±0,21 |
15,4±0,31 |
16,2±0,80 |
15,3±1,20 |
17,3±0,42 |
15,6±06,10 |
Количество эритроцитов до воздействия стресс-фактора составило 7,4 ± 0,16 в 1012 клеток на литр крови. В первые сутки от начала опыта, в опытной группе, наблюдалось постепенное снижение показателя на 0,6 в 1012 клеток на литр крови, в контрольной группе данный показатель снизился на 2 в 1012 клеток на литр крови. На третьи сутки количество эритроцитов в опытной группе составило 6,7 ± 0,18 в 1012 клеток на литр крови, что свидетельствовало о незначительном снижении значения по сравнению с предыдущим отчетным периодом, то же явление наблюдалось у животных в контрольной группе, данный показатель равнялся 5,1 в 1012 клеток на литр крови. Снижение данного показателя к третьему дню произошло в опытной группе на 0,7 · 1012/л, а в контрольной на 2,3 · 1012/л соответственно.
Средний объем эритроцитов в период всего исследования постепенно возрастал, как в опытной, так и в контрольной группах с тенденцией к возращению к первоначальной величине в опытной группе на седьмой день. Если до начала эксперимента объем эритроцитов составлял (63,3 ± 2,54) мкм3, то на первые сутки в крови кроликов опытной группы данный показатель увеличился на 0,5 мкм3, а в контрольной группе – на 3,9 мкм3. На третьи сутки показатель среднего объема эритроцитов продолжал возрастать, в сравнении с первым днем у животных опытной группы на 0,4 мкм3, в то время как в контрольной группе он снизился на 0,6 мкм3.
Гетерогенность размера эритроцита варьировала в пределах (15,5 ± 0,08) %, до влияния стресс-фактора на организм кроликов. В первые сутки после перегруппировки у животных контрольной группы это показатель увеличился на 1,2 %, а в опытной группе получавшей пробиотический препарат «Интестевит-ТМ» данный показатель снизился на 0,1 %. К третьим суткам размер эритроцитов незначительно снижался в обеих группах, к седьмому дню в контрольной группе возрос на 0,6 %, а в опытной находился в пределах первоначальной величины. Изменение размеров эритроцитов в крови (анизоцитоз) может указывать на дегенеративные процессы в эритропоэтической кроветворной системе.
Среднее содержание гемоглобина до начала опыта составило (146,0 ± 11,2) г/л. В течение всего периода эксперимента его уровень находился в пределах физиологической нормы. Однако, в первые сутки от начала эксперимента в контрольной группе отмечено резкое снижение гемоглобина на 31,3 г/л, в то время как в опытной группе концентрация гемоглобина была снижена всего на 7,0 г/л. На третьи сутки у кроликов контрольной группы снижение содержания гемоглобина было на 38,7 г/л, в опытной группе на 14 г/л. К седьмому дню в контрольной группе наблюдалось некоторое увеличение данного показателя, но он находился ближе к нижней границе физиологических критериев.
Содержание гемоглобина в эритроците в опытной группе на первые и третьи сутки не изменилось, а в контрольной-последовало незначительное снижение (на 0,1 пг) данного показателя.
Данные показателя гематокрита до стресс-фактора составили (45,2 ± 3,61) %. В первые сутки от начала опыта в опытной группе значение уменьшилось на 1,5 %, у кроликов в контрольной группе – на 9 %. На третьи сутки в опытной группе процентное содержание эритроцитов крови в ее общем объеме составило (42,3 ± 7,40) %, в контрольной группе – (33,7 ± 4,37) %.
К седьмому дню наблюдений все показатели у животных опытной группы были близки к таковым до начала эксперимента, тогда как в контрольной группе показатели содержания эритроцитов и гемоглобина были все еще несколько снижены.
В мазках крови просматриваются наложения эритроцитов друг на друга – монетные столбики или сланжи. Это связано с закономерностью движения и расположения эритроцитов в токе крови. Результаты состояния расположения эритроцитов в виде сланжей представлены в таблице 2.
Таблица 2
Состояние расположения эритроцитов в крови кроликов при перегруппировке (M ± m, %)
The state of the location of red blood cells in rabbit blood during rearrangement (M ± m, %)
|
Показатель |
До стресса (n = 10) |
1 сутки |
3 сутки |
7 сутки |
|||
|
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
||
|
Свободные эритроциты |
82,2±12,10 |
81,6±1,71 |
70,0±11,0 |
81,6±3,06 |
65,7±10,41 |
78,9±1,97 |
80,9±21,41 |
|
Сланжи клеток: |
|
||||||
|
2–4 |
11,4±1,93 |
11,3±2,01 |
21,5±3,09 |
8,7±3,48 |
9,2±5,34 |
12,7±0,62 |
12,6±0,11 |
|
5–7 |
3,0±0,15 |
2,5±0,88 |
3,5±0,12 |
3,4±1,01 |
3,6±1,12 |
4,7±1,21 |
3,3±0,04 |
|
8 и более |
3,4±0,15 |
4,5±0,26 |
5,0±0,25 |
6,2±1,21 |
21,5±9,27 |
3,7±0,58 |
3,2±0,13 |
До начала эксперимента количество свободных эритроцитов составляло (82,2 ± 12,10) %. В первые сутки в контрольной группе наблюдалось снижение свободных эритроцитов на 0,57 %, в опытной группе – на 12,2 %. На третьи сутки данный показатель в контрольной группе был на том-же уровне, а в опытной группе снизился на 4,3 % в сравнении с первым днем эксперимента. На седьмые сутки у всех животных отмечалось увеличение свободных эритроцитов до первоначальных значений.
Перед перегруппировкой количество сланжевых столбиков в крови составило: от двух до четырех клеток – (11,4 ± 1,93) %; от пяти до семи – (3,0 ± 0,15) %; от восьми клеток и более – (3,4 ± 0,15) %. В первые сутки после воздействия стресс-фактора показатель сланжевых эритроцитов возрос. Сланжи эритроцитов, состоящих от двух до четырех клеток, в контрольной группе у кроликов составили 11,28 %; от пяти до семи клеток – 2,5; от 8 и более – 4,5; в опытной от двух до четырех клеток – 21,5 %; от пяти до семи клеток – 3,5; от восьми и более – 5,0 %.
На третьи сутки отмечалось снижение количества сланжевых столбиков в контрольной группе от двух до четырех эритроцитов в столбике на 2,54 %, и увеличение числа столбиков с количеством клеток от пяти до семи на 0,87 %, а в показателе от восьми и более клеток на 1,68 %. В опытной группе также наблюдалось снижение количества сланжевых столбиков от двух до четырех эритроцитов в столбике на 12,25 % и увеличение числа столбиков с количеством клеток от восьми и более клеток на 16,96 %.
На седьмые сутки в контрольной группе количество сланжевых столбиков возросло в контрольной группе от двух до четырех эритроцитов в столбике на 1,3 %, числа столбиков с количеством клеток от пяти до семи – на 1,7 %, а в показателе от восьми клеток и более – на 0,3 % по сравнению с фоновыми показателями. В опытной группе также наблюдалось увеличение количества сланжевых столбиков от двух до четырех эритроцитов в столбике на 1,2 %, числа столбиков с количеством клеток от пяти до семи – на 0,3%, а в показателе от восьми клеток и более – снижение на 0,2 % по сравнению с фоновыми показателями.
Интенсивное образование «монетных столбиков», или сланжей, связано с изменением микрореологических свойств эритроцитов, возникающих в процессе развития катаболических процессов в организме на фоне стресса. Различные формы эритроцитов, зафиксированные в период исследования, представлены в таблице 3.
Таблица 3
Форма эритроцитов в крови кроликов при перегруппировке (M ± m, %)
The shape of red blood cells in rabbit blood during rearrangement (M ± m, %)
|
Показатель |
До стресса (n = 10) |
1-е сут |
3-и сут |
7-е сут |
|||
|
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
||
|
Обычная |
86,4±18,21 |
15,3±7,43 |
39,5±7,24 |
25,6±6,93 |
61,0±17,31 |
47,7±19,60 |
82,1±12,21 |
|
Серповидная |
0 |
0,5±0,12 |
4,5±0,81 |
0,9±0,31 |
1,0±0,8 |
0,4±0,11 |
0,6±0,01 |
|
Звездчатовидная (колючковидная) |
12,2±0,81 |
77,5±6,76 |
44,5±5,59 |
62,7±6,90 |
32,6±7,05 |
41,2±18,73 |
14,0±2,44 |
|
Каплевидная |
1,2±0,80 |
5,6±1,10 |
3,7±0,55 |
7,5±4,19 |
2,2±0,20 |
10,7±2,22 |
1,6±0,81 |
|
Веретеновидная |
0 |
0 |
1,5±0,84 |
0,4±0,38 |
1,2±0,41 |
0 |
0,7±0,0 |
|
Овалоцит |
0,2±0,01 |
0,8±0,80 |
1,6±0,41 |
2,2±1,06 |
1,0±0,01 |
3,8±0,30 |
0,4±0,02 |
|
Шистоцит |
0 |
0,3±0,07 |
4,7±0,4 |
0,7±0,68 |
1,0±0,04 |
1,2±0,16 |
0,6±0,02 |
В первые сутки после перегруппировки в контрольной группе отмечалось резкое снижение обычных клеток (на 71,1 %) с преобладаним колючковидных форм (на 65,3 %), кроме того возникли новые формы клеток (серповидные и шистоциты). В опытной группе отмечалось снижение обычных клеток (на 46,9 %) с преобладаним колючковидных форм (на 32,3 %), также возросло количество каплевидных клеток (на 2,5 %), веретеновидных клеток и овалоцитов, возникли серповидные и шистоциты. На третьи сутки после перегруппировки в контрольной группе наблюдалось снижение количества обычных клеток на 60,8 %; на фоне увеличения колючковидных форм – на 50,5; каплевидных клеток – на 6,3; овалоцитов – на 2,0; серповидных – на 0,4; шистоцитов – на 0,4 %. В опытной группе отмечалось низкое содержание обычных клеток, на фоне повышенного количества колючковидных форм – на 20,4 %, а на седьмые сутки форма эритроцитов приблизилась к границе фоновых значений в отличии от контрольной группы, что указывает на то, что у животных все еще оставались следы реакции на стресс и процесс адаптации к новым условиям существования еще не закончился. Показатели интенсивности окраски эритроцитов представлены в таблице 4.
Таблица 4
Интенсивность окраски эритроцитов при перегруппировке кроликов (M ± m, %)
The intensity of red blood cell coloration during rabbit rearrangement (M ± m, %)
|
Показатель |
До стресса (n = 10) |
1-е сут |
3-и сут |
7-е сут |
||||
|
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
Контроль (n = 5) |
Опыт (n = 5) |
|||
|
Гиперхромные эритроциты |
||||||||
|
Просветление отсутствует |
69,6±14,10 |
77,9±5,08 |
49,7±13,20 |
75,0±1,55 |
54,4±14,12 |
71,5±4,12 |
69,7±12,0 |
|
|
Нормохромные эритроциты |
||||||||
|
Небольшое центральное |
22,0±5,36 |
14,3±1,19 |
31,4±7,22 |
11,9±2,61 |
19,2±1,67 |
16,0±1,81 |
20,1±2,10 |
|
|
Гипохромные эритроциты |
||||||||
|
Просветление 1/2 центра |
5,6±0,07 |
3,2±1,53 |
10,7±0,80 |
9,1±0,96 |
12,5±0,81 |
9,1±0,98 |
7,0±0,42 |
|
|
Просветление более 1/2 центра |
2,8±0,89 |
4,4±2,33 |
2,1±0,04 |
3,0±1,55 |
1,7±0,48 |
2,9±1,80 |
1,0±0,02 |
|
|
Полное просветление |
0 |
0,1±0,09 |
6,1±0,87 |
0,4±0,02 |
10,5±0,56 |
0,1±0,18 |
2,2±0,08 |
|
|
Просветление с темным центром |
0 |
0,1±0,08 |
0 |
0,6±0,38 |
1,7±0,48 |
0,4±0,45 |
0 |
|
До перегруппировки кроликов количество в их крови эритроцитарных клеток с отсутствующим просветлением насчитывалось (69,6 ± 14,10) %. Показатель с небольшим просветлением окраски составлял (22,0 ± 5,36) %. Клетки с просветлением 1/2 центра – (5,6 ± 0,07) %, а более 1/2 центра – (2,8 ± 0,89) %.
В первые сутки эксперимента в контрольной группе установлено увеличение количества клеток, в которых просветление окраски отсутствовало (на 8,3 %), процентное соотношение просветленных форм на разных стадиях уменьшилось (на 0,6 %), тогда как количество нормоцитов снизилось на 7,7 %. В опытной группе на первые сутки после перегруппировки животных отмечено снижение количества гиперхромных клеток на 8,3 %, показатель процентного соотношения просветленных форм на разных стадиях повысился (на 10,5 %), с одновременным увеличением количества нормоцитов на 9,4 %.
На третьи сутки после перегруппировки животных выявлено увеличение количества гиперхромных эритроцитов в контрольной группе на 5,4 % с одновременным снижением количественного состава нормохромных эритроцитов на 10,1 %, тогда как показатель общего просветления форм эритроцитов на разных стадиях был увеличен на 4,7 %. У кроликов в опытной группе получавших пробиотический препарат «Интестевит-ТМ» количество гиперхромных эритроцитов было снижено на 15,2 %, с одновременным уменьшением количества нормохромных эритроцитов на 2,8 %. Показатель общего просветления форм эритроцитов на разных стадиях у животных в данной группе был увеличен на 18,0 %.
На седьмые сутки после перегруппировки у животных в опытной группе наблюдалось выравнивание интенсивности окраски по всем показателям до величин полученных перед перегруппировкой животных. В контрольной группе у кроликов все еще наблюдалось повышенное содержание гиперхромных эритроцитов – на 1,9 %, на фоне снижения количества нормохромных клеток – на 6,0 % и увеличение количества гипохромных эритроцитов на 4,1 %.
Гиперхромия эритроцита зависит от утолщения слоя гемоглобина, т. е. от увеличения толщины эритроцита. Гипохромия может зависеть либо от снижения количества гемоглобина в единице эритроцита, либо эритроцит становится ненормально тонким. Просветление эритроцита с темным центром (мишеневидный эритроцит – кодоцит) наблюдается при железодефицитных анемиях.
Заключение. Применение пробиотического препарата «Интестевит-ТМ» в дозе 0,5 г перорально позволяет стабилизировать общее содержание компонентов красной крови уже на первые сутки после перегруппировки кроликов. Без коррекции адаптационных способностей кроликов в указанный период, нормализация данных показателей наблюдается только на седьмые сутки. Морфологическая оценка состояния эритроцитов по форме, степени интенсивности их окраски, образования сланжей и других отклонений у животных получавших пробиотический препарат «Интестевит-ТМ» указывает на их более раннюю приспособленность (1–2 сут) к изменению условий существования после перегруппировки в отличие от животных контрольной группы (до 7 сут и более).
1. Федорова А.О. Эритропоэз красного костного мозга крыс при стрессе и его коррекции // Ветеринария. 2021. № 8. С. 35–38. https://doi.org/10.30896/0042-4846.2021.24.8.35-38. EDN: https://elibrary.ru/IUVIUK.
2. Афанасьева А.И., Смеян Д.А. Биохимический статус крови и воспроизводительная способность крупного рогатого скота черно-пестрой породы при использовании фитоадаптогенов // Вестник КрасГАУ. 2024. № 2. С. 123–132. https://doi.org/10.36718/1819-4036-2024-2-123-132. EDN: https://elibrary.ru/PKYYYA.
3. Федорова А.О., Кухаренко Н.С. Реакция показателей красной крови нетелей на длительное воздействие транспортного стресса // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса: Наука и высшее профессиональное образование. 2019. № 1(53). С. 202–210. https://doi.org/10.32786/2071-9485-2019-01-27 EDN: https://elibrary.ru/ZTJGDJ.
4. Гарская Н.А., Перетятько Л.Г., Ткачев А.В. Особенности интегральных гематологических индексов неспецифической резистентности у свиней полтавской мясной породы при действии технологических стресс факторов // Международный вестник ветеринарии.2022. № 1. С. 166–174. https://doi.org/10.52419/issn2072-2419.2022.1.166. EDN: https://elibrary.ru/INVLOM.
5. Сагитдинов Ф.А., Лешонок О.И., Ткаченко И.В. Особенности формирования генетической структуры групп крови при смене поколений животных // Животноводство и кормопроизводство. 2021. Т. 104. № 3. С. 176–185. https://doi.org/10.33284/2658-3135-104-3-176. EDN: https://elibrary.ru/FZEGKH.
6. Карушева К.Ю., Коноплев В.А., Ковалев С.П. Клинико-гематологические показатели собак при стрессе // Ветеринария и кормление. 2019. № 1. С. 44–46. https://doi.org/10.30917/ATT-VK-1814-9588-2019-1-14. EDN: https://elibrary.ru/VVHPSR.
