УДК 615.2 Лекарственные средства по их основному действию
УДК 615.9 Токсикология. Учение о ядовитых веществах. Отравления
УДК 636.5 Домашняя птица
Цель исследования – изучение взаимосвязи между микробиологическими показателями рыбы, зараженной диплостомозом и постдиплостомозом, и показателями ветеринарно-санитарной безопасности водоемов, задействованных при ее выращивании. Задачи: определение основных паразитологических показателей зараженных рыб (интенсивность инвазии (ИИ), экстенсивность инвазии (ЭИ), видовая предрасположенность рыбы к возбудителям трематодозов); проведение микробиологического анализа полученной свежей рыбы и места ее выращивания с учетом степени инвазированности рыбы возбудителями диплостомоза и постдиплостомоза. Исследование проведено в условиях Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института в летний и осенний сезоны года. Материал исследования – рыба разных видов: Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб), Cyprinus carpio (карп), Ctenopharyngodon idella (белый амур), Abramis brama (Лещ), как зараженная трематодами, так и клинически здоровая. Изучению была подвергнута вода места добычи рыбы, отобранная из Нижнедонского канала, Веселовского, Пролетарского и Цимлянского водохранилищ. Наименьшая ИИ и ЭИ установлена у рыб вида Ctenopharyngodon idella (белый амур). ИИ у толстолоба в сравнении с белым амуром была в 11,3 раза выше, у карпа – в 9,3 раза, у леща – в 6,6 раза; ЭИ была выше у толстолоба в 11,3 раза, у карпа – в 11,0 раз; у леща – в 3,3 раза. У высокоинвазированных рыб вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолобик), Cyprinus carpio (карп) мезофильных аэробов и факультативных анаэробных микроорганизмов обнаружено соответственно в 14,7 и 4,24 раза больше в сравнении со здоровой рыбой; по среднему значению обнаруженных бактерий группы кишечной палочки – в 2,54 и 1,86; по количеству обнаруженных Staphylococcus sp. – в 24,3 и 33,15; Escherichia sp. – в 1,5 и 0,6; Klebsiellа sp. – в 110 и 85; Salmonella sp. – в 45 и 0,8 раза больше. Установлена корреляционная зависимость между общим микробным числом водоемов и числом мезофильных аэробов и факультативных анаэробов в выловленной живой рыбе (коэффициент корреляции 0,99).
ветеринарно-санитарная экспертиза, свежая рыба, микробиологические показатели, трематодозы, интенсивность инвазии (ИИ), экстенсивность инвазии (ЭИ), микрофлора воды
Введение. Рыбоводческая деятельность была и остается одной из ведущих отраслей в Российской Федерации, что обеспечивается огромным рыбохозяйственным фондом нашей страны. За последние 10 лет объем добычи рыбы увеличился на 47 % в сравнении с предыдущим десятилетием [1]. Благодаря инновационному оборудованию стало возможным получение высококачественной продукции, обладающей большим количеством необходимых человеку полезных веществ. Особенно активно рыбохозяйственная деятельность осуществляется на территории Южного федерального округа в связи с благоприятными климатическими условиями территорий. При всех типах рыбоводства преобладает разведение карповой, осетровой, хищной рыбы [2].
В процессе производства рыба может быть заражена патогенами бактериальной, вирусной, паразитарной этиологии, поэтому необходимо осуществлять контроль на всех этапах выработки рыбной продукции. Так, согласно ветеринарному законодательству, в свежей рыбе не допускается обнаружение жизнеспособных личинок гельминтов, опасных для здоровья человека [3]. В этот перечень возбудителей паразитарных болезней входят описторхисы, клонорхисы, псевдомфисты, метагонимусы, нанофиетусы, эхинохазмусы, меторхисы, россикотремы, апофалусы, дифиллоботрии, анизакиды и др. С целью предупреждения паразитарных болезней предусмотрен комплекс ветеринарных профилактических и лечебных мер на рыбоводческих предприятиях, проведение ветеринарно-санитарной экспертизы живой рыбы непосредственно перед ее реализацией и на перерабатывающих предприятиях [4]. Однако учету не подлежат заболевания, не оказывающие прямого воздействия на организм человека, но способные стать причиной отравлений и токсикоинфекций. К числу таких заболеваний относятся диплостомоз и постдиплостомоз, возбудителями которых являются трематоды [5]. Размер тела трематод не более 1,0 мм, они имеют вытянутую овальную форму тела, на передней части – ротовую присоску и несколько придаточных. Промежуточными хозяевами принято считать пресноводных моллюсков и рыб разных видов, окончательным или дефинитивным хозяином – рыбоядных птиц. Для человека данное заболевание не является опасным, но, по данным многих авторов, способно стать причиной снижения качества получаемой продукции рыбного происхождения, опасной для здоровья человека и животных [6]. При этом существует мнение, что рыба может быть подвержена контаминации патогенными и условно-патогенными микроорганизмами еще на этапе ее выращивания, чему способствует низкое санитарное состояние места обитания [7].
Цель исследования – изучение взаимосвязи между микробиологическими показателями рыбы, зараженной диплостомозом и постдиплостомозом, и показателями ветеринарно-санитарной безопасности водоемов, задействованных при ее выращивании.
Задачи: определение основных паразитологических показателей зараженных рыб: интенсивность инвазии (ИИ), экстенсивность инвазии (ЭИ), видовая предрасположенность рыбы к возбудителям трематодозов; проведение микробиологического анализа полученной свежей рыбы и места ее выращивания с учетом степени инвазированности рыбы возбудителями диплостомоза и постдиплостомоза.
Материалы и методы. Исследование было проведено в условиях Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института в летний и осенний сезоны года. Материалом для исследования послужила рыба разных видов – Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб), Cyprinus carpio (карп), Ctenopharyngodon idella (белый амур), Abramis brama (лещ), как зараженная трематодами, так и клинически здоровая. Изучению была также подвергнута вода места добычи рыбы, отобранная из Нижнедонского канала, Веселовского, Пролетарского и Цимлянского водохранилищ.
Паразитологическое исследование рыбы проводилось с использованием метода микроскопии ввиду небольших размеров трематод и невозможностью их обнаружения невооруженным глазом.
С целью обнаружения диплостом в глазном яблоке исследовали хрусталик глаза и стекловидное тело на наличие трематод. Пораженные постдиплостомами участки кожных покровов вскрывали скальпелем. Полученное содержимое переносили в чашку Петри. После предварительной обработки полученный материал изучали под микроскопом для подсчета особей паразитов с последующим определением ИИ и ЭИ.
Для лабораторного анализа рыбы небольшое количество мышечной ткани, но не менее 26 г, отобранной с разных частей туловища, измельчали стерильными ножницами и переносили в колбу, откуда отбиралось необходимое для исследований в последующем количество рыбного фарша.
Отбор проб воды производился с каждого участка вылова рыбы металлическим черпаком в стерильные фляги объемом 500 мл.
Микробиологический анализ рыбной продукции, воды естественных и искусственных водоемов осуществлялся после внесения исследуемого материала на общие, элективные и дифференциально-диагностические питательные среды с последующим инкубированием в заданном температурном режиме (33,5 ± 4,5°) в течение 18–48 ч [8, 9].
Расчет статистических показателей проводился согласно общепринятым математическим формулам, рекомендованным при работе с качественными и количественными величинами, полученными при проведении опыта. Для выявления взаимосвязи между сравниваемыми признаками использовался расчет линейной корреляции Пирсона, а для обозначения правильности гипотез результатов исследований – критерий Стьюдента [10].
Результаты и их обсуждение. Согласно результатам паразитологических исследований свежей рыбы, представленным в таблице 1, заражению диплостомами и постдиплостомами в наибольшей степени была подвержена рыба вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб) и Cyprinus carpio (карп). Так, результаты процентного соотношения зараженных особей составили 23,81 и 31,5 %; среднего значения обнаруженных личинок – 35,58 ± 3,95 и 17,60 ± 2,64 ед. соответственно.
Таблица 1
Результаты гельминтологического исследования рыбы, зараженной трематодами
|
Вид рыбы |
Кол-во обследованных |
Кол-во зараженных |
Интенсивность инвазии, особ/экз. |
Экстенсивность инвазии, % |
|
Толстолоб (Hypophthalmichthys molitrix) |
105 |
25 |
35,58 ± 3,95 |
23,81 |
|
Карп (Cyprinus carpio) |
103 |
24 |
17,60 ± 2,64 |
23,30 |
|
Лещ (Abramis brama) |
101 |
7 |
12,57 ± 1,22 |
6,93 |
|
Белый амур (Ctenopharyngodon idella) |
95 |
2 |
1,9 ± 0,15 |
2,11 |
Наименьшая интенсивность и экстенсивность инвазии установлена у рыб вида Ctenopharyngodon idella (белый амур), что можно расценить как их низкую предрасположенность к возбудителям трематодозов рыб. Интенсивность инвазии у толстолоба в сравнении с белым амуром была выше в 11,3 раза, у карпа – в 9,3, у леща – в 6,6 раза; экстенсивность инвазии (ЭИ) была выше у толстолоба в 11,3 раза, у карпа – в 11,0, у леща – в 3,3 раза.
Бактериологический анализ зараженной и клинически здоровой рыбы представлен в таблице 2. Как в здоровой, так и в зараженной трематодами рыбе при ее микробиологическом исследовании были обнаружены бактерии рода Staphylococcus, Escherichia, Klebsiellа, Salmonella.
Таблица 2
Бактериальная обсемененность промысловых рыб, выловленных
из естественных водоемов Волго-Донского бассейна
|
Показатель качества рыбной продукции |
Бактериальная обсемененность промысловых рыб |
||||
|
Толстолоб (Hypophthalmichthys molitrix) |
Лещ (Abramis brama) |
Карп (Cyprinus carpio) |
Белый амур (Ctenopharyngodon idella) |
||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
|
Клинически здоровая рыба |
|||||
|
БГКП (0,01 г/см3) |
0,73 ± 0,40 |
0,5 ± 0,1 |
0,7 ± 0,3 |
0,30 ± 0,11 |
|
|
КМАФАнМ, КОЕ/г (1·104) |
1,14 ± 0,037 |
1,50 ± 0,29 |
1,55 ± 0,44 |
1,10 ± 0,19 |
|
|
Микроорганизмы, обнаруженные в клинически здоровой рыбе |
|||||
|
Staphylococcus sp. (0,01 г) |
0,30 ± 0,15 |
0,10 ± 0,05 |
0,19 ± 0,08 |
0,10 ± 0,05 |
|
|
Escherichia sp. (0,01 г) |
0,20 ± 0,17 |
0,30 ± 0,17 |
– |
0,40 ± 0,23 |
|
|
Klebsiellа sp. (0,01 г) |
0,01 ± 0,005 |
0,03 ± 0,013 |
0,02 ± 0,01 |
0,06 ± 0,023 |
|
|
Salmonella sp. в 25 г продукции |
0,02 ± 0,01 |
– |
– |
– |
|
|
Рыба, зараженная личинками трематод |
|||||
|
БГКП (0,01 г/см3) |
1,86 ± 0,87 |
1,9 ± 0,56* |
1,3 ± 0,77 |
0,30 ± 0,07 |
|
|
КМАФАнМ, (КОЕ/г 1·104) |
16,8 ± 9,9*** |
6,5 ± 2,3** |
6,58 ± 3,2** |
4,58 ± 1,7** |
|
Окончание табл. 2
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
Микроорганизмы, обнаруженные в зараженной трематодами рыбе |
||||
|
Staphylococcus sp. (0,01 г) |
7,3 ± 3,7*** |
1,76 ± 0,9*** |
6,3 ± 3,5*** |
1,5 ± 0,7*** |
|
Escherichia sp. (0,01 г) |
0,30 ± 0,17 |
0,36 ± 0,17 |
0,6 ± 0,21 |
0,5 ± 0,37 |
|
Klebsiellа sp. (0,01 г) |
1,1 ± 0,55*** |
0,70 ± 0,33*** |
1,7 ± 0,7*** |
0,3 ± 0,02*** |
|
Salmonella sp. в 25 г продукции |
0,90± 0,36*** |
– |
0,80 ± 0,48 |
0,10 ± 0,07 |
Примечание : (*) – р ≤ 0,05; (**) – р ≤ 0,01; (***) – р ≤ 0,001 относительно незараженной рыбы.
Так, у высокоинвазированных рыб вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб), Cyprinus carpio (карп) мезофильных аэробов и факультативных анаэробных микроорганизмов обнаружено соответственно в 14,7 и 4,24 раза больше в сравнении со здоровой рыбой; по среднему значению обнаруженных бактерий группы кишечной палочки – в 2,54 и 1,86; по количеству обнаруженных Staphylococcus sp. в 24,3 и 33,15; Escherichia sp. – в 1,5 и 0,6; Klebsiellа sp. – в 110 и 85; Salmonella sp. – в 45 и 0,8 раза больше соответственно.
У низкоинвазированных рыб вида Abramis brama (лещ) и Ctenopharyngodon idella (белый амур) общее количество микроорганизмов превышало таковое в здоровой рыбе в 4,3 и 4,16 раза соответственно; по количеству бактерий группы кишечной палочки – в 19 и 0,1; Staphylococcus sp. – в 17,6 и 15; Escherichia sp. в 1,2 и 1,25; Klebsiellа sp. – в 2,3 и 1,75 раза соответственно.
Таблица 3
Микробное загрязнение воды в местах вылова рыбы
|
Микробиологические показатели санитарной безопасности водоема |
Водоем |
|||
|
Нижнедонской канал |
Пролетарское водохранилище |
Веселовское водохранилище |
Цимлянское водохранилище |
|
|
ОМЧ, КОЕ/мл (1·106) |
13,8 ± 5,06 |
19,6 ± 7,26 |
16,8 ± 8,21 |
13,5 ± 5,38 |
|
Коли индекс (не более 9, КОЕ/л) |
5,5 ± 0,29 |
7,6 ± 0,3 |
8,1 ± 0,8 |
4,3 ± 0,25 |
|
Коли титр (не менее 111 мл) |
152,1 ± 35,0 |
153,2 ± 35,6 |
180,0 ± 21,3 |
125,5 ± 38,4 |
|
Обнаруженные микроорганизмы (1·104 КОЕ/мл) |
||||
|
Micrococcus sp. |
2,3 ± 0,7 |
2,7 ± 0,9 |
1,4 ± 0,6 |
2,3 ± 1,0 |
|
Azotobacter sp. |
1,2 ± 0,4 |
1,7 ± 0,8 |
2,9 ± 0,7 |
3,3 ± 0,12 |
|
Pseudomonas sp. |
4,2 ± 1,1 |
3,3 ± 1,7 |
2,1 ± 0,8 |
7,4 ± 2,9 |
|
Bacillus sp. |
3,66 ± 1,6 |
9,56 ± 3,2 |
10,03 ± 4,3 |
1,0 ± 0,33 |
|
Klebsiellа sp. |
11,2 ± 3,3 |
14,3 ± 4,2 |
9,6 ± 2,7 |
8,6 ± 2,6 |
|
Escherichia sp. |
2,3 ± 0,8 |
4,3 ± 2,1 |
6,5 ± 3,2 |
2,2 ± 0,9 |
|
Staphylococcus sp. |
1,35 ± 0,21 |
1,59 ± 0,4 |
2,69 ± 0,64 |
1,20 ± 0,61 |
|
Salmonella sp. |
5,28 ± 2,7 |
12,8 ± 5,2 |
2,03 ± 1,03 |
5,8 ± 2,3 |
Поэтому с целью определения взаимосвязи между микрофлорой водоема и выловленной живой рыбы провели корреляционный анализ, при расчете которого определили показатель Пирсона в каждой исследуемой группе сравниваемых признаков. После чего определили среднее значение среди полученных величин:
Сравнивая полученный коэффициент корреляции, равный 0,99, со значением для четырех измерений, полученное число превосходило табличное не только для достоверности 95 %, но и для достоверности 99 %.
Заключение. Исходя из результатов исследования, отмечаем, что наиболее восприимчивы к трематодозам рыбы вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолобик) и Cyprinus carpio (карп), экстенсивность инвазии которых составила 23,81 и 31,5 % соответственно; интенсивность инвазии – 35,58 ± 3,95 и 17,60 ± 2,64 особ/экз. соответственно.
При изучении сравниваемых микробиологических показателей рыб отметили, что показатели клинически здоровых, низко- и высокоинвазированных рыб отличались между собой по количеству обнаруженного КМАФАнМ, суммарного значения БКГП, в т. ч. бактерий рода Staphylococcus, Escherichia, Klebsiellа, Salmonella. Более того, при высоких ИИ и ЭИ рыбы установлены и более высокие значения показателей исследуемых микроорганизмов.
При проведении микробиологического анализа воды естественных и искусственных водоемов обнаружили высокие значения бактерий разных видов, в т. ч. патогенных, из которых отметили Klebsiellа sp., Escherichia sp. Staphylococcus sp., Salmonella sp., также диагностируемых в свежей рыбе.
Таким образом, неудовлетворительное санитарно-бактериологическое состояние водоема и сопутствующая инвазия трематодами могут стать одной из ведущих причин прижизненной контаминации рыбы условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, опасными для здоровья человека. Поэтому ветеринарно-санитарная оценка водоемов должна проводиться комплексно с включением показателей паразитологического и микробиологического состояния рыбы и микробиологических показателей санитарной безопасности водоема.
1. Семененко С.Я. Волгоградское водохранилище: история, проблемы, решения // Известия Нижневолжского агроуниверситетского комплекса. Наука и высшее профессиональное образование. 2017. № 1 (45). С. 53–63. EDN YSLEBB.
2. Дюльгер Г.П., Табаков Г.П. Основы ветеринарии: учеб. пособие для вузов. 3-е изд., стер. СПб.: Лань, 2020. 476 с.
3. Атаев А.М., Зубаирова М.М. Ихтиопатология: учеб. пособие. СПб.: Лань, 2015. 252 с.
4. Иванов В.П., Егорова В.И., Ершова Т.С. Ихтиология. Основной курс. 3-е изд., перераб. СПб.: Лань, 2017. 360 с.
5. Пронин В.В., Фисенко С.П. Ветеринарно-санитарная экспертиза с основами технологии и стандартизации продуктов животноводства: практикум. 3-е изд., стер. СПб.: Лань, 2018. 240 с.
6. Ветеринарно-санитарная экспертиза сырья и продуктов животного и растительного происхождения: лабораторный практикум: учеб. пособие / И.А. Лыкасова [и др.]. 2-е изд., перераб. СПб.: Лань, 2015. 304 с.
7. Изучение влияния ассоциативного проявления Cheyletiella spp. и Trichodectes spp. на цитологические показатели лабораторных животных с учетом инокуляционной особенности / А.П. Марченко [и др.] // Ветеринария Кубани. 2023. № 1. С. 26–28. DOI:https://doi.org/10.33861/2071-8020-2023-1-26-28. EDN ABMYPM.
8. Сазонова Е.А., Гунько М.В. Распространенность штаммов E. coli у различных видов животных и птицы // Ветеринария и кормление. 2023. № 3. С. 70–72. DOI:https://doi.org/10.30917/ATT-VK-1814-9588-2023-3-18. EDN RKOPBY.
9. Исследования санитарно-гигиенического состояния леща и воды в местах его обитания / Н.А. Каниева [и др.] // Вестник Астраханского государственного технического университета. Сер. «Рыбное хозяйство». 2021. № 4. С. 39–45. DOI:https://doi.org/10.24143/2073-5529-2021-4-39-45. EDN LDMXOE.
10. Мамаев А.Н., Кудлай Д.А. Статистические методы в медицине. М.: Практическая медицина, 2021. 136 с.
11. Mamaev A.N., Kudlaj D.A. Statisticheskie metody v medicine. M.: Prakticheskaya medi-cina, 2021. 136 s.
